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“假阴性”与“假阳性”效果怎样判断?
2016-07-07 16:53
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假阴性判断:造成假阴性效果的缘故原由有许多,主要体现在FAM扩增曲线不起来,缘故原由包括标本抑制,核酸提取失败,基因突变以及仪器故障等。 现在海内主流PCR试剂都不带内标监控功效,用于检测目的基因的FAM扩增曲线既用来定量又用于定性(判断阴阳性),因此FAM扩增曲线的优劣很是要害。关于此类无内标试剂,建议团结乙肝血清标记物效果(五项定量/定性效果)来判断阴阳性,纵然是FAM曲线有扩增也应该参考此效果,特殊是E抗原效果。同时,关于拥有竞争性内标监控功效的试剂来说,可有以下四种情形爆发:如FAM无扩增,内标有扩增:效果正常,判断该样本为阴性效果;如FAM无扩增,内标也无扩增:效果异常,可能缘故原由核酸提取失败或有抑制,一定要重复实验;如FAM有扩增,内标有扩增:效果正常,由于待测核酸和内标在统一反应系统下扩增;如FAM有扩增,内标无扩增:效果正常,强阳性样本会抑制内标的扩增,导致内标效果偏弱或阴性。 假阳性判断(怎样判断):临床PCR检测当中造成假阳性效果的情形较量少,缘故原由包括试剂污染,气溶胶污染,操作污染,扩增产品污染,非特异性扩增,耗材污染等,以是建议一定要做阴性比照来监控是否保存污染。
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